加和规范色谱柱的管理延长使用寿命

    它是用压泵将具有不同性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂，缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后依次进入检测器，色谱信号由记录仪、积分仪或色谱工作站记录。

    色谱柱是液相色谱的心脏，在液相色谱仪的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性，延长柱子的使用寿命非常重要。

    色谱柱使用一段时间后就会出现柱压升、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化，如不采取措施，将会缩短色谱柱的使用寿命，影响工作效率，并造成一定的经济损失。因此，有必要加和规范色谱柱的管理，从而延长色谱柱的使用寿命。

    影响色谱柱使用寿命的因素

    1 流动相

    在以水溶液为流动相时，水溶液中的微生物例如细菌容易生长，当用水溶液或有机酸缓冲液保护柱子时，一些霉菌可能在色谱柱中滋生，堵塞固定相颗粒间的空隙。由于湿法填充技术的问世，目前普遍使用的色谱柱填料直径一般都小于10um，流动相中的颗粒杂质容易沉积在柱头然后慢慢堵塞柱子。流动相的pH值对色谱柱也有影响，是对化学键合硅胶填料，水溶液的pH***适范围在2~7.5之间，当pH>8时，硅胶会释出生成絮状物堵塞柱子，且难以复原，柱效快降低，甚至*失效。

    当在缓冲液中加入有机溶剂例如甲醇或乙腈时，盐类的溶解度下降，会析出盐沉淀，堵塞柱子。同时流动相中的有机溶剂和盐会腐蚀色谱柱头的筛板，产生柱头凹陷。流动相的性对柱子也有一定影响，对于硅胶柱，甲醇、水、冰乙酸等性较大物质会破坏填料；反之，对于化学键合硅胶，性小的物质如正丁醇、二氯甲烷等也起同样的作用。碱性溶液会破坏阳离子交换树脂色谱柱，而酸性溶液容易损坏阴离子交换树脂柱。

    2 样品和固定相

    如果有少量或微量的样品不能够溶解在流动相中，在通过固定相会堵塞柱子，样品中的颗粒杂质也会堵塞柱子。样品组分例如糖、蛋白质等通过柱子时会产生不可逆吸附，这样固定相的活性点被覆盖。样品组分还会与固定相产生反应，尤其是对于氨基柱的影响较为严重。因为氨基易与酐、酮形成希夫(Schiff)缩合而减少活性点，使保留时间缩短。色谱柱键合相基团脱落、固定相分解和活性基团变性以及会影响柱效和保留时间的显著改变。大多数键合相都是通过硅氧硅键(Si-O-Si)连接在硅基质上，形成带有有机基团的固定相Si-O-Si-R(R为CnH2n+1)，硅氧硅键可能在水溶液中水解而断裂，使键合基团脱落。