色谱柱的物理性质、化学性质介绍

点击次数：2717 发布时间：2022-05-17

　　色谱柱的物理性质、化学性质介绍

　　色谱柱的选择直接影响了液相色谱分析中分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。

　　根据色谱柱的参数可以给我们提供一个初步的选择，但由于各个仪器厂商的填料技术和键合技术都有差异。即使都是C18柱，不同品牌、同一品牌不同系列都有不同的功能，有能耐受低pH值的、有耐温的、有适合碱性样品的等等。

　　一、物理性质：

　　1、柱长，内径，如250*4.6mm。一般柱长在2—250mm，柱越长，分离度越，但柱压更，分离所需时间更长；但分离度与理论塔板数的平方根成正比，所以一昧增加柱长并不是*的分离手段，一般情况下，150mm、5um的填料可以提供足够的塔板数。

　　2、粒径，影响色谱分离度。粒径越小，分离越快，柱效越，但柱压力越，柱容易被污染，导致柱寿命降低。常见分析柱通常使用5um填料，复杂的多组分样品分离一般使用3.5um粒径，更大内径的制备色谱柱通常使用更大的粒径。

　　3、孔径，60A，100A，120A，300A等。孔径小，则含孔率，比表面积大，载碳量；色谱柱填料孔径大小需和分子大小相匹配，分子自由进出填料孔并与孔内表面的键合相进行分离分配，通常要求孔径直径是分子直径的3倍以上，一般小分子使用80—120A，大分子使用300A。

　　4、颗粒形状，一般有球形和不规则形，当使用黏度较大的流动相时，球形颗粒可以降低柱压，延长色谱柱寿命。

　　二、化学性质：

　　1、硅胶基质：通用的基质，度大，化学修饰容易，但使用的pH值范围有限(一般为2—8，修饰的可以达到1—12)。

　　2、聚合物基质：多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化学稳定，应用pH范围宽，具有更的疏水性，对蛋白质等样品分离效果较好；但度较小，有机溶剂可能导致聚合物溶胀而受损，批次重复性较差，商品化色谱柱不多，一般价格较贵。

　　3、载碳量：基质表面键合相的比例，载碳量，则保留增加，适合分析非性化合物。